液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较,具有高效、快速、灵敏等特点。

1.液相色谱仪原理

系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。

液相色谱仪原理

2.液相色谱仪组成部分

液相色谱仪系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。液相色谱仪主要系统分为进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。

进样系统:一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。

输液系统:该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。

分离系统:该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性、多孔性和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍,或者用化学法偶联各种基因(如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。

液相色谱仪组成部分

3.液相色谱仪作用

液相色谱仪广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域,可控制色谱仪所有参数和运行,可实施编辑功能,自动进行序列样品分析;实时在线显示色谱图,积分并报告出分析结果,绘制标准曲线等。

液相色谱仪作用