PCR(聚合酶链式反应)是一种用于扩增DNA的技术,可以制备大量相同或特异性DNA片段,并且在现代生物学及医学诊断中得到广泛应用。
PCR 主要分为三个步骤:变性、退火、与延伸。它们依次进行,通过不断循环这个过程可以扩增目标 DNA 片段。
1.变性
将待扩增的Double-stranded DNA通过加热或化学方法使其解旋成两条单链DNA,使其中的两根DNA互相分离并形成模板。
2.退火
将至少两个引物 (primers) 加入反应混合物中, 引物通过互补配对与单链DNA上的模板区结合,定位到需要复制的目标序列的起始和终止位置。
3.延伸
加入DNA聚合酶,此时引物与单链DNA结合,该酶按照引物序列依据碱基互补原则进行DNA复制,产生新的双链DNA,重复上述步骤,末端产物会被无限扩增。
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