液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较,具有高效、快速、灵敏等特点。下面小编给大家介绍一下“液相色谱仪主要测什么 液相色谱仪操作步骤”

 

一、液相色谱仪主要测什么

液相色谱主要用于对吸收紫外线的液态有机物(不饱和有机物)进行定性、定量分析和纯度分析,定性,是保留时间的特征峰值。没有办法分析物质结构,但如果已知的物质是x,则要测量的物质可以与x标准物质比较。液相色谱测定表明,该物质的停留时间相同,测定结果表明,该物质主要用于测试中的色谱鉴定。

液相色谱仪定量,即浓度与峰值面积成正比。要测量的材料的纯度是根据标准产品的标准曲线计算的。主要用于内容的确定。纯度分析,这是以波长为基础的。物质的纯度大致由样品在特定波长注入时主成分色谱和杂质色谱的峰值面积决定,主要用于测定相关物质。

液相色谱仪主要测什么

二、液相色谱仪操作步骤

1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。

2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 

3、打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。

4、进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。

5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10 ml/min。

6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。

7、设计走样方法。点击file,选取select users and methods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击new method。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。

8、进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。

9、关机时,先关计算机,再关液相色谱。

液相色谱仪操作步骤